NORMĂ nr. 0/2006

Capitolul I – Dispoziții generale

Articolul 1

Prezenta norma sanitară veterinara stabilește condițiile de sănătate a animalelor ce guvernează miscarea ecvideelor între statele membre ale Uniunii Europene, denumite în continuare state membre, pe teritoriul României și importul lor din tari terțe.

Articolul 2

În scopurile prezentei norme sanitare veterinare, se utilizează următoarele definiții:

a) exploatatie - unitate agricolă sau de antrenament, grajd ori, în general, orice incinte sau amenajări în care sunt ținute ori crescute în mod obișnuit ecvideele, indiferent de utilizare;

b) ecvidee - animale sălbatice sau domestice din specia ecvine (incluzând zebrele) sau asinii ori descendenții incrucisarilor acestor specii;

c) ecvidee înregistrată - orice ecvidee înregistrată, astfel cum este definită de Directiva Consiliului 90/427/CEE, identificata prin intermediul unui document de identificare emis de autoritatea de creștere sau orice alta autoritate competentă a tarii de origine a animalului, care administrează cartea genealogica ori registrul pentru acea rasa de animale, sau orice asociație ori organizație internationala ce se ocupa de cai pentru competiție sau curse;

d) ecvidee pentru tăiere - ecvidee destinate a fi transportate la abator pentru tăiere, fie direct, fie după tranzitul printr-o piața sau un centru autorizat de colectare;

e) ecvidee pentru reproducție și producție - alte ecvidee decât cele menționate la lit. c) și d) ale prezentului articol;

f) stat membru sau țara terta libera de pesta ecvina - orice stat membru sau țara terta în care nu s-a detectat nici o evidenta clinica, serologica (la ecvideele nevaccinate) ori epidemiologica de pesta ecvina pe teritoriul în cauza în ultimii 2 ani și în care nu s-au efectuat vaccinari împotriva bolii în ultimile 12 luni;

g) boli cu notificare obligatorie - bolile enumerate în anexa nr. 1;

h) medic veterinar oficial - medicul veterinar desemnat de autoritatea veterinara centrala a unui stat membru sau a unei tari terțe;

i) admitere temporară - statutul unui animal înregistrat, care este originar într-o țara terta și este admis pe teritoriul Comunității Europene pentru o perioadă mai mica de 90 de zile, ce va fi stabilită de Comisia Europeană în funcție de situația sănătății animalelor din țara de origine.

Capitolul II – Reguli pentru miscarea ecvideelor

Articolul 3

(1) Autoritatea veterinara centrala a României trebuie să autorizeze miscarea ecvideelor înregistrate pe teritoriul sau sau sa trimită ecvidee către un alt stat membru doar dacă ele satisfac condițiile stabilite de art. 4 și 5.

(2) Totuși, autoritatea veterinara centrala a României ca stat de destinație poate acorda derogări generale sau limitate cu privire la transportul de ecvidee, care:

- sunt conduse călare sau dirijate, în scopuri sportive ori recreative, pe drumuri situate lângă frontierele interne ale Comunității Europene; - iau parte la evenimentele culturale sau similare acestora ori la activități organizate de organismele locale autorizate, evenimente situate lângă granitele interne ale Comunității Europene; - sunt destinate numai pasunatului sau muncii temporare lângă frontierele interne ale Comunității Europene.

(3) Dacă autoritatea veterinara centrala a României face uz de aceasta autorizare, ea trebuie să informeze Comisia Europeană asupra conținutului derogarilor acordate.

Articolul 4

(1) Ecvideele nu trebuie să prezinte nici un semn clinic de boala la inspecție. Inspecția trebuie să fie efectuată cu 48 de ore înainte de imbarcarea sau încărcarea lor. În cazul ecvideelor înregistrate, aceasta inspecție va fi totuși solicitată numai pentru comerțul intracomunitar, fără să se prejudicieze prevederile art. 6.

(2) Fără a prejudicia cerințele alin. (5), referitoare la bolile cu notificare obligatorie, medicul veterinar oficial trebuie, în momentul inspecției, să fie convins de faptul că nu exista motive - în special pe baza declarațiilor proprietarului sau crescatorului - pentru a concluziona ca ecvideele au venit în contact cu alte ecvidee care suferă de o boala infectioasa sau contagioasa, în decursul celor 15 zile dinaintea inspecției.

(3) Ecvideele nu trebuie să fie destinate tăierii în baza unui program național de eradicare a unei boli contagioase sau infectioase.

(4) Ecvideele trebuie să fie identificate în maniera următoare:

(i) în cazul căilor înregistrați, prin intermediul unui document de identificare prevăzut de Directiva Consiliului 90/427/CEE (5), care trebuie să certifice în special ca au fost respectate prevederile art. 5 alin. (5) și (6) din Directiva Consiliului 90/427/CEE. Medicul veterinar oficial va trebui sa suspende validitatea acestui document pentru perioada interdictiilor prevăzute la alin. (5) din prezentul articol sau la art. 5. După taierea căilor înregistrați, documentul trebuie înapoiat autorității care l-a emis. Procedura pentru implementarea acestui punct va fi adoptată de Comisia Europeană în conformitate cu procedura comunitara; (îi) în cazul ecvideelor pentru reproducție și producție, printr-o metoda de identificare ce va fi stabilită de Comisia Europeană în conformitate cu procedura comunitara. Până în momentul în care aceasta metoda va fi utilizata, metodele de identificare naționale aprobate oficial trebuie să rămână aplicabile, cu condiția ca acestea să fie notificate către Comisia Europeană în decursul a 3 luni de la data adoptării prezentei norme sanitare veterinare.

(5) În plus față de cerințele stabilite de art. 5, ecvideele nu trebuie să provină dintr-o exploatatie care a fost supusă uneia dintre următoarele dispoziții de interdicție:

a) dacă nu au fost tăiate toate animalele din speciile sensibile la boala situate în exploatatie, perioada de interdicție cu privire la exploatatia de origine trebuie să fie de cel puțin:

- 6 luni în cazul ecvideelor suspecte de a fi contractat durina, începând cu data ultimului contact efectiv sau posibil cu un animal bolnav. Totuși, în cazul unui armasar, interdicția se va aplica până când animalul va fi castrat; - 6 luni în cazul morvei sau encefalomielitei ecvidee, începând din ziua în care sunt tăiate ecvideele care suferă de boala în cauza; - în cazul anemiei infectioase, până la data la care, după ce animalele infectate au fost tăiate, animalele care au rămas au prezentat reactie negativa la doua teste Coggins efectuate la un interval de 3 luni; - 6 luni în cazul stomatitei veziculoase; - o luna de la ultimul caz înregistrat, în cazul rabiei; - 15 zile de la ultimul caz înregistrat, în cazul antraxului;

b) dacă toate animalele din speciile sensibile la boala, existente în exploatatie, au fost tăiate, iar incintele au fost dezinfectate, perioada de interdicție va fi de 30 de zile începând cu ziua în care animalele au fost distruse și incintele dezinfectate, cu excepția antraxului, când perioada de interdicție este de 15 zile.

Autoritatea veterinara centrala a României poate acorda derogări de la aceste măsuri de interdicție pentru hipodromuri și piste de curse și va informa Comisia Europeană referitor la natura oricăror derogări acordate.

(6) Dacă autoritatea veterinara centrala a României întocmește sau a întocmit un program de combatere voluntara sau obligatorie pentru o boala la care ecvideele sunt sensibile, aceasta poate prezenta programul Comisiei Europene, în termen de 6 luni de la notificarea prezentei norme sanitare veterinare, subliniind în special:

- distribuția bolii pe teritoriul sau; - motivele programului, luând în considerație importanța bolii și avantajele sale cost/beneficiu; - zona geografică în care va fi implementat programul; - categoriile de statut care vor fi aplicate unităților, standardele ce trebuie atinse pentru fiecare specie și procedurile de testare ce vor fi utilizate; - procedurile de monitorizare a programului; - acțiunea care va fi întreprinsă în cazul în care, dintr-un motiv oarecare, o exploatatie își pierde statutul; - măsurile ce vor fi luate dacă rezultatele testelor efectuate în concordanta cu prevederile programului sunt pozitive; - natura nediscriminatorie a comerțului pe teritoriul respectiv cu privire la comerțul intracomunitar.

(7) Comisia Europeană va examina programele prezentate de autoritatea veterinara centrala a României.

(8) Atunci când este cazul, aceasta le va aproba în conformitate cu procedura comunitara. Orice garanții suplimentare, generale sau specifice, care pot fi cerute, pot fi definite în conformitate cu aceeași procedura. Astfel de garanții nu trebuie să le depășească pe cele cerute de un stat membru pe teritoriul sau.

(9) Programele propuse de autoritatea veterinara centrala a României pot fi modificate sau suplimentate în conformitate cu procedura comunitara. Modificările sau suplimentarile acestor programe care au fost deja aprobate ori ale garanțiilor la care se referă alin. (2) pot fi aprobate în conformitate cu aceeași procedura.

Articolul 5

(1) Dacă un stat membru nu este indemn de pesta ecvina, în sensul art. 2 lit. f), poate expedia ecvidee din acea parte a teritoriului sau care este considerată a fi infectata, în sensul alin. (2) al prezentului articol, doar în condițiile stabilite la alin. (3).

(2) a) O parte din teritoriul unui stat membru va fi considerată ca fiind infectata cu pesta ecvina dacă:

- o evidenta clinica, serologica (la animalele nevaccinate) și/sau epidemiologica a relevat prezenta pestei ecvine în ultimii 2 ani; sau - s-a efectuat vaccinarea împotriva pestei ecvine în ultimele 12 luni.

b) Partea teritoriului considerată a fi infectata cu pesta ecvina trebuie să cuprindă cel puțin:

- o zona de protecție cu o raza de minimum 100 km în jurul oricărui centru de infectie; - o zona de supraveghere de cel puțin 50 km, care se extinde dincolo de zona de protecție, în care nu s-a efectuat nici o vaccinare în ultimele 12 luni.

c) Regulile care controlează măsurile de combatere referitoare la teritoriile și zonele menționate la lit. a) și b) și derogarile relevante sunt specificate de D irectiva Consiliului 92/35/CEE, transpusa în legislația naționala prin Norma sanitară veterinara privind măsurile de control și combatere a pestei africane a calului, aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentației și pădurilor nr. 497/2001, publicat în Monitorul Oficial al României, Partea I, nr. 186 din 19 martie 2002.

d) Toate ecvideele vaccinate care se găsesc în zona de protecție trebuie să fie înregistrate și identificate în concordanta cu art. 6 alin. (1) din Directiva Consiliului 92/35/CEE, transpusa în legislația naționala prin norma sanitară veterinara aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentației și pădurilor nr. 497/2001.

Documentul de identificare și/sau certificatul de sănătate trebuie să poarte o mențiune clara referitoare la aceasta vaccinare.

(3) România poate expedia din teritoriul menționat la alin. (2) lit. b) doar ecvidee care îndeplinesc următoarele cerințe:

a) să fie expediate doar în anumite perioade ale anului ce vor fi stabilite de autoritatea veterinara centrala a României, avându-se în vedere activitatea insectelor vectori;

b) nu trebuie să prezinte nici un simptom clinic de pesta ecvina în ziua inspecției menționate la art. 4 alin. (1);

c) dacă nu au fost vaccinate împotriva pestei ecvine, trebuie să fi fost supuse și sa fi reactionat negativ la un test de fixare a complementului pentru pesta ecvina descris în anexa nr. 4, în doua randuri, la un interval de 21-30 de zile între cele doua teste, dintre care cel de-al doilea trebuie să fi fost efectuat în cursul a 10 zile înainte de expediere; dacă au fost vaccinate împotriva pestei ecvine, trebuie să nu fi fost vaccinate în ultimele doua luni și trebuie să fi fost supuse testului de fixare descris în anexa nr. 4, la intervalele menționate mai sus, fără să se fi înregistrat o creștere a titrului de anticorpi;

d) trebuie să fi fost ținute într-o stațiune de carantina pentru o perioadă minima de 40 de zile înainte de expediere;

e) trebuie să fi fost protejate împotriva insectelor vectori pe perioada carantinei și în cursul transportului de la statia de carantina la locul de expediere.

Articolul 6

(1) Dacă România și alte state membre implementeaza un sistem de control alternativ ce asigura garanții echivalente celor stabilite la art. 4 alin. (5), în ceea ce privește transportul pe teritoriul lor al ecvideelor și al ecvideelor înregistrate, în special prin intermediul unui document de identificare, își pot garanta reciproc derogări de la prevederile art. 4 alin. (1) și ale art. 8 alin. (1) lit. b).

(2) Părțile vor informa Comisia Europeană despre aceasta.

Articolul 7

(1) Ecvideele trebuie transportate cat mai curând posibil de la exploatatia de origine către locul de destinație, fie direct, fie printr-o piața sau un centru de colectare aprobat, astfel cum este definit la art. 2 alin. (2) lit. o) din Norma sanitară veterinara privind problemele de sănătate a animalelor, ce afectează comerțul României cu statele membre ale Uniunii Europene cu animale din speciile bovine și porcine, aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentației și pădurilor nr. 236/2002, publicat în Monitorul Oficial al României, Partea I, nr. 835 din 20 noiembrie 2002, ce transpune în legislația naționala Directiva Consiliului 64/432/CEE, în vehicule sau containere ce au fost curatate și dezinfectate în mod regulat cu o substanța dezinfectanta la intervale care vor fi stabilite de statul membru de expediere.

(2) Vehiculele trebuie să fie proiectate astfel încât dejectiile, asternutul sau furajele ecvideelor sa nu poată cădea din ele în cursul transportului. Transportul trebuie să fie efectuat astfel încât sănătatea și bunăstarea ecvideelor să poată fi protejate eficient.

(3) Autoritatea veterinara centrala a României ca țara de destinație poate acorda, în mod general sau limitat, o derogare de la unele cerințe ale art. 4 alin. (5) pentru orice animal care poarta o marca specială care indica faptul ca este destinat tăierii, cu condiția ca certificatul de sănătate sa menționeze o astfel de derogare.

(4) În cazul acordării acestei derogări, ecvideele pentru tăiere trebuie să fie transportate direct la abatorul desemnat și să fie tăiate în termen de 5 zile de la sosirea la abator.

(5) Medicul veterinar oficial trebuie să înregistreze numărul de identificare sau numărul documentului de identificare al animalului tăiat și sa trimită autorității competente de la locul de expediere, la cererea acesteia din urma, o atestare a faptului ca animalul a fost tăiat.

Articolul 8

(1) Autoritatea veterinara centrala a României trebuie să se asigure ca:

a) ecvideele înregistrate, care părăsesc exploatatiile de pe teritoriul sau, sunt însoțite de documentul de identificare stabilit la art. 4 alin. (4), împreună cu - dacă sunt destinate comerțului intracomunitar - atestarea prevăzută în anexa nr. 2;

b) ecvideele pentru reproducție, producție și tăiere sunt însoțite, în cursul transportului, de un certificat de sănătate care respecta prevederile anexei nr. 3.

(2) Certificatul sau, în cazul unui document de identificare, formularul ce conține particularitățile de sănătate ale animalului trebuie să fie întocmit, fără a prejudicia prevederile art. 6, în decursul celor 48 de ore anterioare imbarcarii lui sau nu mai târziu de ultima zi lucrătoare anterioară imbarcarii, în cel puțin una dintre limbile oficiale ale statelor membre de expediere și de destinație. Durata valabilității certificatului este de 10 zile. Certificatul trebuie să fie constituit dintr-o singura fila.

(3) Importul de ecvidee, altele decât ecvideele înregistrate, poate fi însoțit de un singur certificat de sănătate pe lot în loc de certificatul individual menționat la alin. (1) lit. b).

Articolul 9

Regulile stabilite în Norma sanitară veterinara privind controalele veterinare și zootehnice aplicabile comerțului României cu statele membre ale Uniunii Europene cu unele animale vii și produse de origine animala, aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentației și pădurilor nr. 580/2002, publicat în Monitorul Oficial al României, Partea I, nr. 250 din 11 aprilie 2003, ce transpune în legislația naționala Directiva Consiliului 90/425/CEE, se aplică în special controalelor la origine, organizării și urmăririi controalelor ce vor fi efectuate de statul membru de destinație și măsurilor de protecție care trebuie să fie implementate.

Articolul 10

(1) Experții veterinari ai Comisiei Europene, în cooperare cu autoritatea veterinara centrala a României, pot organiza inspecții ad-hoc în România, pentru a se asigura de aplicarea uniforma a prevederilor prezentei norme sanitare veterinare. Comisia Europeană va informa autoritatea veterinara centrala a României despre rezultatele acestor inspecții.

(2) Autoritatea veterinara competența centrala a României, ca țara pe al carei teritoriu va fi efectuată inspecția, va asigura experților tot sprijinul necesar pentru a-și îndeplini sarcinile.

Capitolul III – Reguli pentru importul din tari terțe

Articolul 11

(1) Ecvideele importate în Comunitatea Europeană trebuie să satisfacă condițiile stabilite de art. 12, 13, 14, 15 și 16 din Directiva Consiliului 90/426/CEE, transpusa în legislația naționala prin prezenta norma sanitară veterinara.

(2) Până la data intrării în vigoare a deciziilor adoptate conform art. 12, 13, 14, 15 și 16, România va aplica importului de ecvidee din tari terțe condiții cel puțin echivalente celor care rezultă din aplicarea cap. II al prezentei norme sanitare veterinare.

Articolul 12

(1) Importul ecvideelor în Comunitatea Europeană va fi autorizat doar din tari terțe care figurează pe o lista ce va fi întocmită sau modificată în conformitate cu procedura comunitara.

(2) Luând în considerație situația de sănătate și garanțiile prevăzute de țările terțe pentru ecvidee, poate fi decis, în conformitate cu procedura comunitara, ca autorizarea prevăzută de prezentul alineat să se aplice pentru întreg teritoriul tarii terțe sau numai unei părți a teritoriului sau.

(3) În acest scop și pe baza standardelor internaționale relevante, se va tine cont de modul în care țara terta aplica și implementeaza respectivele standarde, în special principiul regionalizarii în cadrul teritoriului sau, și în ceea ce privește cerințele sanitare pe care le aplica importului din alte tari terțe sau din Comunitatea Europeană.

(4) Când se întocmește sau se modifica lista prevăzută la alin. (1) se va tine cont de:

a) statutul de sănătate al ecvideelor, al altor animale domestice și sălbatice din țara terta, în particular privind bolile animalelor exotice sau orice aspecte legate de sănătatea generală și de mediu din țara terta, care ar presupune un risc pentru statutul Comunității Europene privind sănătatea sau mediul;

b) legislația tarii terțe referitoare la sănătatea și bunăstarea animalelor;

c) organizarea autorității veterinare competente și a serviciilor sale de inspecție, prerogativele acestor servicii, supravegherea care se aplică acestora și mijloacele de care dispun, inclusiv capacitatea personalului și a laboratoarelor, pentru a aplica legislația naționala în mod eficient;

d) asigurările pe care autoritatea competentă veterinara a tarii terțe le poate da privind concordanta sau echivalenta cu condițiile de sănătate animala din Comunitatea Europeană;

e) dacă țara terta este membra a Oficiului Internațional al Epizootiilor (OIE) și dacă furnizează cu regularitate și rapiditate informații privind existenta bolilor infectioase sau contagioase ale ecvideelor pe teritoriul sau, în particular acele boli catalogate de OIE și prevăzute în anexa nr. 1;

f) garanțiile oferite de țara terta de a informa direct Comisia Europeană și statele membre:

(i) în decurs de 24 de ore de la confirmarea apariției bolii infectioase a ecvideelor, prevăzută în anexa nr. 1, sau a oricărei schimbări în programul de vaccinare referitor la astfel de boli; (îi) în cel mai scurt timp de la orice schimbare propusă în regulile sanitare naționale referitoare la ecvidee, în particular cele privind importul de ecvidee; (iii) la intervale regulate, despre statusul de sănătate din teritoriu privind ecvideele;

g) toată experienta importurilor anterioare de ecvidee în viața din tari terțe și de rezultatele oricăror controale efectuate la import;

h) rezultatele inspecțiilor și/sau auditului comunitar efectuate în țara terta, în particular de rezultatele evaluărilor autorităților competente sau, unde Comisia Europeană cere astfel, raportul emis de autoritățile competente privind inspecțiile pe care acestea le-au efectuat;

i) regulile privind prevenirea și controlul bolilor infectioase sau contagioase ale animalelor, în vigoare în țara terta, și implementarea acestora, inclusiv regulile privind importul de ecvidee din alte tari terțe.

(5) Comisia Europeană va pune la dispoziție publicului toate listele actualizate, întocmite și modificate potrivit prevederilor alin. (1).

(6) Aceste liste pot fi combinate cu alte liste întocmite în scopul sănătății animalelor și al celei publice și pot, de asemenea, sa includă modele de certificate de sănătate.

(7) Condițiile speciale de import pentru fiecare țara terta sau grup de tari terțe, referitor la situația de sănătate animala a ecvideelor în țara sau în țările respective, trebuie stabilite în conformitate cu procedura comunitara.

(8) Reguli detaliate de aplicare a prezentului articol și criteriile de includere a țărilor terțe sau a unor părți ale țărilor terțe pe lista prevăzută la alin. (1) vor fi adoptate în conformitate cu procedura comunitara.

Articolul 13

(1) Ecvideele trebuie să provină din tari terțe:

a) indemne de pesta ecvina;

b) care au fost indemne pentru 2 ani de encefalomielita ecvina venezueleana (EEV);

c) care au fost indemne timp de 6 luni de durina și morva.

(2) Comisia Europeană poate decide în conformitate cu procedura comunitara:

a) ca prevederile alin. (1) să se aplice numai unei părți din teritoriul unei tari terțe.

În cazul în care cerințele pentru pesta ecvina se aplică regional, trebuie să fie respectate cel puțin măsurile stabilite de art. 5 alin. (2) și (3);

b) să solicite garanții suplimentare pentru bolile neinregistrate în Comunitatea Europeană.

Articolul 14

Înainte de ziua încărcării pentru transportarea către statul membru de destinație, ecvideele trebuie să fi rămas fără întrerupere pe teritoriul sau într-o parte a teritoriului unei tari terțe ori, în cazul regionalizarii, în partea teritoriului definit conform art. 13 alin. (2) lit. a), pentru o perioadă ce va fi determinata în deciziile care vor fi adoptate conform art. 15. Ele trebuie să provină dintr-o exploatatie aflată sub supraveghere veterinara.

Articolul 15

(1) Importul ecvideelor de pe teritoriul unei tari terțe sau o parte a acestuia, definit în conformitate cu art. 13 alin. (2) lit. a), care figurează pe lista întocmită în concordanta cu art. 12 alin. (1), trebuie autorizat numai dacă ecvideele, pe lângă cerințele art. 13:

a) se conformează cerințelor de sănătate a animalelor adoptate, cu referire la specia în cauza și la categoriile de ecvidee.

Baza de referința pentru stabilirea condițiilor de sănătate a animalelor în concordanta cu prezentul alineat o constituie standardele stabilite la art. 4 și 5;

b) în cazul unei tari terțe care nu este libera de stomatita veziculoasa sau de arterita virala de cel puțin 6 luni, ecvideele trebuie să respecte următoarele cerințe:

(i) trebuie să provină dintr-o exploatatie care a fost indemna de stomatita veziculoasa de cel puțin 6 luni și trebuie să fi reactionat negativ la un test serologic anterior expedierii; (îi) în cazul arteritei virale, ecvideele masculi trebuie - fără a prejudicia art. 19 pct. (îi) - sa fi reactionat negativ la un test serologic, la un test de izolare a virusului sau la orice alt test recunoscut care să garanteze statutul de liber față de virus.

(2) Comisia Europeană poate defini, în conformitate cu procedura comunitara, categoriile de ecvidee masculi pentru care se aplică aceasta cerința.

Articolul 16

(1) Ecvideele trebuie identificate în conformitate cu art. 4 alin. (4) și însoțite de un certificat întocmit de un medic veterinar oficial din țara terta exportatoare. Acest certificat trebuie:

a) să fie emis în ziua încărcării animalelor pentru expediere către statul membru de destinație sau, în cazul căilor înregistrați, în ultima zi lucrătoare dinaintea imbarcarii;

b) să fie întocmit în cel puțin una dintre limbile oficiale ale statelor membre de destinație și în una dintre limbile oficiale ale statului membru în care se efectuează inspecția de import;

c) să fie în original;

d) sa ateste ca animalele satisfac cerințele prezentei norme sanitare veterinare și cele stabilite conform prezentei norme sanitare veterinare cu privire la importul din tari terțe;

e) să fie constituit dintr-o singura fila;

f) să fie redactat pentru un singur destinatar sau, în cazul animalelor pentru tăiere, pentru un singur transport, cu condiția ca animalele să fie marcate și identificate corespunzător.

Autoritatea veterinara competența centrala a României va informa Comisia Europeană dacă va face uz de aceasta opțiune.

(2) Certificatul trebuie să fie redactat într-o formă care să fie conformă cu modelul stabilit în conformitate cu procedura comunitara.

Articolul 17

(1) Vor fi efectuate controale ad-hoc de experții veterinari ai statelor membre și ai Comisiei Europene pentru a verifica dacă prevederile prezentei norme sanitare veterinare, în special cele ale art. 12 alin. (2), sunt puse în aplicare.

(2) Dacă aceste controale efectuate în temeiul prezentului articol evidențiază fapte grave ca cele la adresa unei exploatații aprobate, Comisia Europeană va informa fără întârziere statele membre și, în continuare, va adopta o decizie care să suspende temporar autorizarea.

(3) Experții statelor membre care vor fi însărcinați cu aceste controale vor fi numiți de către Comisia Europeană ca urmare a unei propuneri din partea statelor membre.

(4) Aceste controale se vor efectua în numele Uniunii Europene, care va suporta costul pentru cheltuielile implicate de acestea.

Articolul 18

(1) Imediat după sosirea în România, ca țara de destinație, ecvideele pentru tăiere trebuie duse la un abator fie direct, fie după tranzitul printr-o piața ori un centru de colectare și, în concordanta cu cerințele de sănătate a animalelor, trebuie tăiate într-o perioadă de timp specificată în deciziile ce vor fi adoptate conform art. 15.

(2) Fără a aduce atingere oricăror condiții speciale ce pot fi adoptate în conformitate cu procedura comunitara, autoritatea veterinara centrala a României poate, din motive de sănătate a animalelor, sa desemneze abatorul la care trebuie duse aceste ecvidee.

Articolul 19

Comisia Europeană, actionand în conformitate cu procedura comunitara: (i) poate decide ca importul dintr-o țara terta sau dintr-o parte a unei tari terțe să fie limitat la specii sau categorii particulare; (îi) va stabili, fără sa prejudicieze art. 15 din Directiva Consiliului 90/426/CEE, transpusa în legislația naționala prin prezenta norma sanitară veterinara, condițiile speciale pentru intrarea temporară pe teritoriul Comunității Europene a ecvideelor înregistrate sau a ecvideelor destinate utilizarilor speciale ori reintrarea lor pe teritoriul Comunității Europene după ce au fost exportate temporar; (iii) va determina condițiile de transformare a intrării temporare în intrare definitivă; (iv) va desemna laboratorul național de referința pentru una sau mai multe boli ale ecvideelor prevăzute în anexa nr. 1 și va stipula funcțiile, sarcinile și procedurile privind colaborarea cu laboratoarele responsabile pentru diagnosticul bolilor infectioase ale ecvideelor din statele membre.

Capitolul IV – Prevederi finale

Articolul 20

Anexele nr. 1-4 fac parte integrantă din prezenta norma sanitară veterinara.

Anexa 1 ------- la norma sanitară veterinara ---------------------------- BOLI CU NOTIFICARE OBLIGATORIE Următoarele boli trebuie notificate obligatoriu: - durina; - morva; - encefalomielita ecvina (de toate tipurile, inclusiv EEV); - anemie infectioasa; - rabie; - antrax; - pesta ecvina; - stomatita veziculoasa.

Anexa 2 ------- la norma sanitară veterinara ---------------------------- INFORMAȚII DE SĂNĂTATE(a) HEALTH INFORMATION(a) Nr. pasaportului

Passport No.

Subsemnatul, certific(b) ca animalul din specia ecvidee descris mai sus îndeplinește următoarele cerințe: I, the undersigned, certify(b) that the equine animal described above meets the following requirements:

a) a fost examinat astăzi și nu prezintă nici un semn clinic de boala;

a) it has been examined today and shows no clinical sign of disease;

b) nu este destinat tăierii în condițiile unui program național de eradicare a unei boli infectioase sau contagioase;

b) it is not intended for slaughter under a național programme of contagious or infectious disease eradication;

c) nu provine dintr-un teritoriu sau parte a teritoriului unui stat membru sau tari terțe supuse unor restrictii din cauza pestei ecvine(c),

c) - it does not come from the territory or a part of the territory of a Member State or third country which is the subject of restrictions for reasons of African horse sickness(c) sau or - provine dintr-un teritoriu sau parte a teritoriului unui stat membru care a fost supus interdicției din motive de sănătate a animalelor și a fost supus, cu rezultate satisfăcătoare, testelor prevăzute la art. 5 (3) al Directivei Consiliului 90/426/CEE, în statia de carantina a

între

.. și

.(c) - it comes from the territory or part of the territory of a Member State which was subject to prohibition for animal health reasons and has undergone, with satisfactory results, the tests provided for în Article 5(3) of Directive 90/426/EEC în the quarantine station of

between

.. and

(c); -------------- (a) Aceasta informație nu este solicitată atunci când exista un acord bilateral în concordanta cu art. 6 al Directivei Consiliului 90/426/CEE. (a) This information is not required where there is a bilateral agreement în accordance with Article 6 of Directive 90/426/EEC (b) Valid pentru 10 zile. (b) Valid for 10 days. - nu este vaccinat împotriva pestei ecvine, sau a fost vaccinat împotriva pestei ecvine la

..(c)(d); - it is not vaccinated against African horse sickness, or it was vaccinated against African horse sickness on

..(c)(d);

d) nu provine dintr-o exploatatie care a fost supusă interdicției din motive de sănătate a animalelor și nici nu a avut contact cu ecvidee provenite dintr-o exploatatie care a fost supusă interdicției din motive de sănătate animala:

d) it has not come from a holding which was subject to prohibition for animal health reasons nor had contact with equidae from a holding which was subject to prohibition for animal health reasons:

- timp de șase luni în cazul ecvideelor suspecte de a fi contractat durina, începând cu data ultimului contact efectiv sau posibil cu un animal bolnav. Totuși, în cazul unui armasar, interdicția se va aplica până când animalul este castrat. - during six months în the case of equidae suspected of having contracted dourine, beginning on the date of the last actual or possible contact with a sick animal. However, în the case of a stallion, the prohibition shafi apply until the animal is castrated, - timp de șase luni în cazul morvei sau encefalomielitei ecvine, începând cu ziua în care ecvideele ce suferă de boala în cauza sunt tăiate, - during six months în the case of glanders or equine encephalomyelitis, beginning on the day on which the equidae suffering from the disease în question are slaughtered, - în cazul anemiei infectioase până la data la care, animalele infectate au fost tăiate iar cele rămase au prezentat reactie negativa la cele doua teste Coggins efectuate la interval de trei luni, - în the case of infectious anaemia, until the date on which, the infected animals having been slaughtered, the remaining animals have shown a negative reaction to two Coggins tests carried out three months apart, - timp de șase luni de la ultimul caz, în cazul stomatitei veziculoase, - during six months from the last case, în the case of vesicular stomatitis, - timp de o luna de la ultimul caz, în cazul rabiei, - during one month from the last case, în the case of rabies, - timp de 15 zile de la ultimul caz, în cazul antraxului, - during 15 days from the last case, în the case of anthrax, - dacă toate animalele din speciile sensibile la boala situate în exploatatie au fost tăiate, iar incinta dezinfectata în cursul a 30 de zile, începând cu ziua în care animalele au fost distruse și incinta a fost dezinfectata, exceptând cazul antraxului, când perioada de interdicție este de 15 zile; - if all the animals of species susceptible to the disease located on the holding have been slaughtered and the premises disinfected during 30 days, beginning on the day on which the animals were destroyed and the premises disinfected, except în the case of anthrax, where the period of prohibition is 15 days; -------------- (c) A se șterge orice nu se aplică. (c) Delete whichever does not apply (d) Data vaccinarii trebuie înscrisă în pasaport. (d) The vaccination date must be entered în the passport.

e) din cunoștințele mele, nu a venit în contact cu ecvidee suferind de o boala infectioasa sau contagioasa, în cele 15 zile precedente acestei declarații;

e) to the best of my knowiedge, it has not been în contact with equidae suffering from an infectious or contagious disease în the 15 days prior to this declaration.

f) în momentul inspecției a fost corespunzător pentru a fi transportat pe traseul stabilit în concordanta cu prevederile Directivei Consiliului 91/628/CEE (e)

f) at the time of inspecțion it was fit to be transported on the intended journey în accordance with the provisions of Directive 91/628/CEE (e).

------------ (e) Aceasta declarație nu-i scutește pe transportatori de obligațiile lor în concordanta cu prevederile comunitare în vigoare ce se referă, în particular, la starea animalelor ce urmează să fie transportate. (e) This statement does not exempt transporters from their obligations în accordance with Community provisions în force în particular regarding the fitness of animals to be transported.

Data

Date

Locul

Place

Ștampila și semnatura medicului veterinar oficial(1)

Stamp and signatura of the official veterinarian(1)

(1) Numele cu majuscule și calitatea

(1) Name în block capitals and capacity

Anexa 3 ------- la norma sanitară veterinara ---------------------------- MODEL MODEL CERTIFICAT DE SAMATATE HEALTH CERTIFICATE pentru comerțul dintre statele membre ale Uniunii Europene for trade between Member States of the EEC ECVIDEE EQUIDAE Nr.:

. No.:

. Statul membru de expediere:

. Member State of dispatch:

Ministerul responsabil:

. Ministry responsible:

Departamentul teritorial responsabil:

Territorial Department responsible:

.. I. Număr de ecvidee:

.. I. Number of equidae:

. II. Identificarea ecvideelor:

.. II. Identification of equidae:

.

Numărul de

ecvidee(1)

Number of

equidae(1)

Specia de cal, magar,

catar, bardou

Species horse, ass,

mule, hinny

Rasa, vârsta,sexul

Breed, Age, Sex

Metoda de identificare

și identificarea(2)

Method of identification

and identification(2)

(1) În cazul animalelor destinate tăierii, natura marcarii speciale.

(1) În the case of animals for slaughter, nature of the special mark.

(2) Un pasaport destinat identificarii ecvideelor poate fi atasat acestui

certificat cu condiția ca numărul acestuia să fie declarat.

(2) A passport identifying the equine animal may be attached to thls

certificate provided that its number is stated.

III. Originea și destinația animalului/animalelor: III. Origin and destination of animal/s: Animalul/animalele trebuie trimis(e) The animal/s is/are to be sent dela:

.. (Locul de export) from:

.. (Place of export) la:

. (statul membru și locul de destinație) to:

. (Member State and place of destination) Numele și adresa expeditorului:

.. Name and adress of consignor:

..

.. Numele și adresa destinatarului:

..

.. Name and adress of consignee:

..

.. IV. Informații despre sănătate(a) IV. Health information(a) Subsemnatul, certific ca animalul(ele) descris(e) mai sus îndeplinește/îndeplinesc următoarele cerințe: I,the undersigned, certify that the animal/s described above meet/s the following requirements: 1. a(au) fost examinat(e) astăzi și nu a(u) prezentat nici un semn clinic de boala; 1. it/they has/have been examined today and show/s no clinical sign of disease; 2. nu este/sunt destinat(e) tăierii în baza unui program național de eradicare a bolii contagioase sau infectioase; 2. it/they is/are not intended for slaughter under a național programme of contagious or infectious disease eradication; 3. - nu provin(e) din teritoriul sau partea teritoriului unui stat membru sau a unei tari terțe care este supusă restrictiilor din cauza pestei ecvine, 3. - it/they come/s from the territory or part of the territory of a Member State or a third country which is the subject of restrictions for reasons of African horse sickness, sau or - provin(e) din teritoriul sau partea teritoriului unui stat membru care a fost supus restrictiilor din cauza pestei ecvine și a(u) fost supus(e), cu rezultate satisfăcătoare, testelor prevăzute la art. 5 alin. (3) al Directivei Consiliului 90/426/CEE în statia de carantina și(b); ------------ (a) Aceasta informație nu este cerută dacă exista un acord bilateral în concordanta cu art. 6 al Directivei Consiliului 90/426/CEE. (a) This Infomnation is not required where there is a bilateral agreement în acoordance with article 6 of Directive 90/426/EEC. - it/they come/s from the territory of a Member State which was the subject of restrictions for reasons of African horse sickness and has/have undergone, with satisfactory results, the test provided for în Article 5 (3) of Directive 90/426/CEE în the quarantine station of between and(b); - nu este/sunt vaccinate împotriva pestei ecvine, - it/they is/are not vaccinated against African horse sickness, sau or - a(u) fost vaccinat(e)împotriva pestei ecvine(b); - it/they was/were vaccinated against African horse sickness on(b); 4. nu provin(e) dintr-o exploatatie care a fost supusă interdicției din motive de sănătate a animalelor și nici nu a(u) avut contact cu ecvidee dintr-o exploatatie care a fost supusă interdicției din motive de sănătate a animalelor: 4. it/they has/have not come from a holding which was subject to prohibition for animal health reasons nor had contact with equidae from a holding which was subject to prohibition for animal health reasons: - timp de șase luni în cazul ecvideelor suspecte de a fi contractat durina, începând cu data ultimului contact efectiv sau posibil cu un animal bolnav. Totuși, în cazul unui armasar, interdicția se va aplica până când animalul este castrat, - during six months în the case of equidae suspected of having contracted dourine, beginning on the date of the last actual or possible contact with a sick animal. However, în the case of a stallion, the prohibition shall apply until the animal is castrated, - timp de șase luni în caz de morva sau encefalomielita ecvina, începând cu ziua în care ecvideele ce suferă de boala în cauza sunt tăiate, - during six months în the case of glanders or equine encephalomyelitis, beginning on the day on which the equidae suffering from the disease în question are slaughtered, - în cazul anemiei infectioase, până la data în care animalele infectate care au fost tăiate, animalele rămase au prezentat o reactie negativa la cele doua teste Coggins efectuate la interval de trei luni, - în the case of infectious anaemia, until the date on which, the infected animals having been slaughtered, the remaining animals have shown a negative reaction to two Coggins tests carried out three months apart, - timp de șase luni de la ultimul caz, în cazul stomatitei veziculoase, - during six months from the last case, în the case of vesicular stomatitis, - timp de o luna de la ultimul caz, în cazul rabiei, - during one month from the last case, în the case of rabies, - timp de 15 zile de la ultimul caz, în cazul antraxului, - during 15 days from the last case, în the case of anthrax, ------------- (b) Se șterge orice nu se aplică. (b) Delete whichever does not apply. - dacă toate animalele din speciile sensibile la boala, situate în exploatatie au fost tăiate iar incinta a fost dezinfectata timp de 30 de zile, începând cu ziua în care animalele au fost distruse și incinta dezinfectata, cu excepția antraxului, când perioada de interdicție este de 15 zile; - if all the animals of species susceptible to the disease located on the holding have been slaughtered and the premises desinfected during 30 days, beginning on the day on which the animals were destroyed and the premises desinfected, except în the case of anthrax, where the period of prohibition is 15 days; 5. din cunoștințele mele, nu a(u) venit în contact cu ecvideele ce suferă de o boala infectioasa sau contagioasa în cele 15 zile dinaintea acestei declarații. 5. to the best of my knowledge, it/they has/have not been în contact with equidae suffering from an infectious or contagious disease în the 15 days prior to this declaration. 6. în momentul inspecției a(u) fost corespunzător (corespunzătoare) pentru a fi transportate pe traseul stabilit în concordanta cu prevederile Directivei Consiliului 91/628/CEE (d) 6. at the time of inspecțion it/they was/were fit to be transported on the intended journey în accordance with the provisions of Directive 91/628/EEC (d) V. Prezentul certificat este valabil 10 zile. V. This certificate is valid for 10 days. Întocmit

.. data

. Done at

, date

. (Ștampila) (semnatura medicului veterinar) Stamp (signature of the official veterinarian)

. (Numele cu majuscule și calitatea medicului veterinar)(c) (Name în capital letters and capacity of signing veterinarian)(c) ------------- (c) În Germania "Beamteter Tierarzt"; în Belgia "Inspecteur veterinaire" sau "Inspecteur Dierenarts"; În Franța "Veterinaire officiel"; în Italia "Veterinario ufficiale"; în Luxembourg "Inspecteur veterinaire"; în Olanda "Officieel Dierenarts"; în Danemarca "Embeds Dyriaege"; în Irlanda "Veterinary inspector; în Marea Britanie "Veterinary inspector"; în Grecia "Episimos ktiniatros"; în Spania "Inspector Veterinario"; și în Portugalia "Inspector Veterinyrio"; în Austria "Amtstierarzi"; Finlanda: "kutmanelainliiakari ou kaupunginetiintaakari ou laaninelainlaakarl/kommunaheierinar ou stadaveterinar ou tinsveterinar; Suedia: "Iansvelerinar, distriklsveleriniir ou grarmvetetinar"; în Cehia: "veterinarni inspektor"; în Estonia: "veterinaarjarelevalve ametnik"; în Cipru; "(*)"; în Letonia: "vaterinarais inspektors"; în Lituania: "veterinarijos Inspektorius"; în Ungaria: "hatosagi allatorvos"; în Malta: "veterinarju ufficjali"; în Polonia: "urzedowy lekarz weterynarii"; în Slovenia: "veterinarski inspeklor"; în Slovacia: "veterinarny inspektor". (c) În Germany "Beamleter Tierarzi; în Belgium "Inspecteur veterinaire" or "Inspecteur Dierenarts"; în France "Veterinaire officiel"; în Italy "Veterinario ufficiale"; în Luxembourg "Inspecteur veterinaire"; în the Netherlands "Officieel Dierenarts"; în Denmark "Embeds Dyriaege"; în Irelaod "Veterinary inspector"; în United Kingdom "Veterinary inspector"; în Greece "Episimos ktiniatros"; În Spain "Inspector Veterinario"; and în Portugal "Inspector Velerinyrio"; Auriche "Amtstierarzi; Finlande: "kutmanelainliakari ou kaupunginetiintaakari ou laaninelainlaakari/kommunaheierinar ou stadaveterinar ou tinsveterinar; Suede: "Iansveterinar, distriklsveleriniir ou gramnvetetinar; în the Czech Republic: "veterinarni inspektor"; în Estonia: "veterinaarjarelavalve ametnik"; În Cyprus: "(*)"; în Latvia: "veterinarais inspektors"; în Lithyania: "veterinarijos inspektorius"; în Hungary: "hatosagi allatorvos"; în Malta: "veterinariu ufficjall"; în Poland: "urzedowy lekerz weterynarii": în Slovenia: "veterinarski inspektor; în Slovakia: "veterinarny inspektor". (d) Aceasta declarație nu îi scutește pe transportatori de obligațiile acestora în conformitate cu prevederile comunitare în vigoare, în special cele privitoare la condiția fizica a animalelor ce urmează a fi transportate. (d) This statement does not extempt transporters from their obligations în accordance with Community provisions în force în particular regarding the fitness of animals to be transported. ------------ (*) limba elena

Anexa 4 ------- la norma sanitară veterinara ----------------------------- PESTA ECVINA DIAGNOSTIC Reactivii pentru tehnicile imunoabsorbante inlantuite enzimatic (ELISA) descrise mai jos pot fi obținuți de la Laboratorul de Referința al Comunității Europene sau de la Laboratoarele de Referința ale 0IE pentru pesta ecvina. 1. TEST ELISA DE COMPETIȚIE PENTRU DETECTAREA PREZETEI ANTICORPILOR IMPOTRIVA VIRUSULUI PESTEI ECVINE (VPE) (TEST PRESCRIS) Testul ELISA de competiție este folosit pentru a detecta anticorpi specifici VPE în ser provenind de la oricare din speciile de ecvidee. Antiserul de cobai contra VPE (denumit în continuare antiser de cobai) este un antiser cu spectru larg, policlonal și imun, specific serogrupului și permite detectarea tuturor serotipurilor cunoscute de virus ale acestei maladii. Principiul testului este întreruperea reacției între antigenul VPE și antiserul de cobai de către o proba de ser de testat. Anticorpii de VPE din proba de ser de testat vor fi în competiție cu aceia din antiserul de cobai, rezultând o reducere a culorii asteptate (după adăugarea anticorpilor anti-cobai marcati enzimatic și a substratului). Serul poate fi testat la o singura dilutie de 1/5 (metoda testului punctual) sau poate fi titrat (metoda titrarii serului) pentru a determina valorile finale ale dilutiei. Valorile de inhibitie mai mari de 50% pot fi considerate ca fiind pozitive. Protocolul testului descris mai sus este folosit în Laboratorul de Referința Regional pentru Pesta Ecvina, Pirbright, Marea Britanie. 1.1. Procedura de testare 1.1.1. Pregătirea placilor 1.1.1.1. Se acoperă plăcile pentru ELISA cu antigen VPE extras din culturile celulare infectate și diluat în soluție tampon carbonata/bicarbonata, la un pH de 9,6. Plăcile de ELISA se incubeaza peste noapte la 4°C. 1.1.1.2. Se spala plăcile de trei ori prin inundarea și golirea godeurilor cu soluție salina fosfata tamponata (SSFT), cu pH de la 7,2 la 7,4, și se usucă pe hârtie adsorbanta. 1.1.2. Godeuri de control 1.1.2.1. Se titreaza serul pozitiv de control într-o serie de dilutie dubla, de la 1/5 ia 1/640, de-a lungul coloanei 1 în soluția tampon de blocare (SFT care conține 0,05 % (v/v) Tween-20, 5,0 % (w/v) lapte praf smantanit (Cadbury's Marvel^TM)și 1,0 % (v/v) ser de la bovine adulte) pentru a reieși un volum total de 50 f2æl/godeu. 1.1.2.2. Se adauga 50 æl din serul negativ de control, la o dilutie de 1/5 (10 æl de ser

40 æl de soluție tampon de blocare) în godeurile A și B ale coloanei 2. 1.1.2.3. Se adauga 100 f2æl/godeu din soluția tampon de blocare, în godeurile C și D ale coloanei 2 (goale). 1.1.2.4. Se adauga 50 f2æl din soluția tampon de blocare în godeurile E, F, G și H ale coloanei 2 (cu ser de cobai de control). 1.1.3. Metoda testului punctual 1.1.3.1. Se adauga câte o dilutie 1/5 din fiecare ser de testat în soluția tampon de blocare, în godeurile corespunzătoare din coloanele de la 3 la 12 (10/f2æl ser

40 æl de soluție tampon de blocare); sau 1.1.4. Metoda de titrare a serului 1.1.4.1. Se prepara o serie dubla de dilutie pentru fiecare proba de testat (de la 1/5 la 1/640) în soluție tampon de blocare, în 8 godeuri ale coloanelor solitare de la 3 la 12. apoi 1.1.5. Se adauga 50 f2æl de antiser de cobai, prediluat în soluție tampon de blocare, în toate godeurile placii pentru ELISA, exceptându-le pe cele goale (toate godeurile conțin acum un volum final de 100 f2æl). 1.1.5.1. Se incubeaza timp de o ora la 37 °C pe un agitator orbital. 1.1.5.2. Plăcile se spala de trei ori și se usucă ca mai sus. 1.1.5.3. Se adauga 50 f2æl de ser de iepure anti-cobai conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat în prealabil în soluție tampon de blocare, în fiecare godeu. 1.1.5.4. Se incubeaza timp de o ora la 37 °C pe un agitator orbital. 1.1.5.5. Plăcile se spala de trei ori și se usucă ca mai sus. 1.1.6. Cromogen Se prepara soluția de cromogen OFD (orto-fenildiamina) conform instrucțiunilor producătorului (0,4 mg/ml în apa distilata sterila), exact înainte de utilizare. Se adauga substratul (peroxid de hidrogen H(2)O(2)) pentru a rezultă o concentrație finala de 0,05 % (v/v) (1/2000 dintr-o soluție de H(2)O(2) %). Se adauga 50 f2æl de soluție OFD în fiecare godeu și se lasă plăcile pe banca timp de 10 minute la temperatura camerei. Se oprește reactia prin adăugarea de 50 f2æl/godeu de acid sulfuric [H(2)SO(4)] 1 M. 1.1.7. Citirea Se citesc spectrofotometric la 492 nm. 1.2. Exprimarea rezultatelor 1.2.1. Utilizând un computer, se determina valorile densitatatii optice (DO), și procentul de inhibitie (PI) pentru serul de testat și cel de control pe baza valorii medii înregistrate în cele 4 godeuri de control cu ser de cobai. Datele exprimate ca valori DO și PI sunt utilizate pentru a se determina dacă testul s-a efectuat în limite acceptabile. Limitele superioare de control (LSC) și limitele inferioare de control (LIC) pentru serul de cobai de control se situeaza între valorile 1,4 și respectiv 0,4 ale DO. Titrul punctului final pentru controlul pozitiv bazat pe un PI de 50 % trebuie să fie de 1/240 (în limitele cuprinse între 1/240 și 1/480). Orice placa ce nu se conformează criteriilor de mai sus trebuie respinsă. Totuși, dacă titrul serului pozitiv de control este mai mare de 1/480 iar probele de testat sunt tot negative, atunci probele de testat negative pot fi acceptate. Godeurile duplicat cu seruri negative de control și godeurile duplicat goale trebuie să înregistreze valori ale PI între

25 % și -25 %, și respectiv între

95% și

105 %. Neincadrarea în aceste limite nu face placa să fie nevalida dar sugereaza ca se dezvolta culoarea de fond. 1.2.2. Pragul de diagnostic (valoarea finala) pentru serul de testat este de 50 % (PI 50 %). Probele care înregistrează valori ale PI mai mari de 50 % sunt înregistrate drept pozitive. Probele care înregistrează valori ale PI mai mici de 50 % sunt înregistrate ca negative. Probele care înregistrează valori ale PI peste și sub pragul pentru godeurile duplicat sunt considerate a fi neconcludente. Astfel de probe pot fi retestate prin testul punctual sau prin titrare. Probele pozitive pot de asemenea să fie titrate pentru a furniza o indicare a gradului de pozitivare. Testul punctual

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

Ctrl

pozitiv

Serul pentru testat

A

1:5

Ctrl negativ

31

32

33

34

35

36

37

38

39

40

B

1:10

Ctrl negativ

31

32

33

34

35

36

37

38

39

40

C

1:20

Gol

D

1:40

Gol

E

1:80

Ctrl cobai

F

1:160

Ctrl cobai

G

1:320

Ctri cobai

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

H

1:640

Ctrl cobai

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

Ctrl pozitiv = test de control pozitiv

Ctrl negativ = test de control negativ

Ctrl cobai = test de control cu ser de cobai

Serul pentru testat

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

Ctrl

pozitiv

Serul pentru testat

A

1:5

Ctrl negativ

1:5

1:5

B

1:10

Ctrl negativ

1:10

1:10

C

1:20

Gol

1:20

1:20

D

1:40

Gol

1:40

1:40

E

1:80

Ctrl cobai

1:80

1:80

F

1:160

Ctrl cobai

1:160

1:160

G

1:320

Ctrl cobai

1:320

1:320

H

1:640

Ctrl cobai

1:640

1:640

Ctrl pozitiv= test de control pozitiv

Ctrl negativ= test de control negativ

Ctrl cobai= test de control cu ser de cobai

2. TESTUL ELISA INDIRECT PENTRU DETECTAREA ANTICORPILOR IMPOTRIVA VIRUSULUI PESTEI ECVINE (AVPE) (TEST PRESCRIS) Testul descris mai jos este în concordanta cu descrierea testului de la capitolul 2.1.11 al Manualului de Standarde pentru Testele de Diagnostic și Vaccinuri al OIE, editia a patra, 2000. Proteina recombinata VP7 a fost utilizata ca antigen pentru determinarea anticorpilor împotriva VPE, având un mare indice de sensibilitate și specificitate. Alt avantaj este faptul ca este stabil și nu este infectant. 2.1. Procedura de testare 2.1.1. Faza solida 2.1.1.1. Plăcile de ELISA sunt acoperite cu AVPE-4 VP7 diluati în soluție tampon carbonata/bicarbonata cu pH de 9,6. Plăcile se incubeaza peste noapte la temperatura de 4°C. 2.1.1.2. Plăcile se spala de cinci ori cu apa distilata care conține 0,01 % (v/v) Tween 20 (soluție de spalare). Plăcile se tamponeaza ușor cu material absorbant pentru a îndepărta reziduurile de la spalare. 2.1.1.3. Plăcile se blocheaza cu soluție salina fosfata tamponata (SSFT)

5 % (w/v) lapte smantanit (lapte praf smantanit Nestle^TM), 200 f2æl/godeu, timp de o ora, la 37°C. 2.1.1.4. Se indeparteaza soluția de blocare și se tamponeaza ușor plăcile cu un material absorbant. 2.1.2. Probele de testat 2.1.2.1. Probele de ser ce urmează a fi testate și serul de control pozitiv și negativ, sunt diluate 1/25 în SSFT

5 % (w/v) lapte smantanit

0,05 % (v/v) Tween 20, câte 100 f2æl pe godeu. Se incubeaza timp de o ora la 37°C. 2.1.2.2. Se spala plăcile asa cum este descris la punctul 2.1.1.2. 2.1.3. Conjugatul 2.1.3.1. Se disperseaza câte 100 f2æl pe godeu de gama-globuline anti-cal conjugate cu peroxidaza din hrean, diluate în SFT

5 % lapte

0,05 % Tween 20, la un pH de 7,2. Se incubeaza o ora la 37°C. 2.1.3.2. Se spala plăcile asa cum este descris la punctul 2.1.1.2. 2.1.4. Cromogen/Substrat 2.1.4.1. Se adauga 200 f2æl pe godeu de soluție de cromogen/ substrat (10 ml de soluție de 80,6 mM de DMAB (dimetil amino benzaldehida)

10 ml de soluție 1.56 mM de MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolina hidrazona clorhidrat)

5 f2æl H(2)0(2)). Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea a 50 f2æl H(2)SO(4) 3N după aproximativ 5-10 minute (înainte ca testul negativ de control sa înceapă să se coloreze). Alți cromogeni, ca ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolina-6-acid sulfonic]), TMB (tetrametil benzidina), sau OFD (orto-fenildiamina) pot fi de asemenea utilizate. 2.1.4.2. Plăcile se citesc la 600 nm (sau 620 nm). 2.2. Interpretarea rezultatelor 2.2.1. Valoarea finala se calculează adaugand 0,6 la valoarea testului de control negativ (0,6 este valoarea standard de deviatie derivata cu un grup de 30 de probe de ser negative). 2.2.2. Probele de testat care dau valori ale absorbtiei mai mici decât valorile finale sunt considerate ca negative. 2.2.3. Probele de testat care dau valori ale absorbtiei mai mari decât valorile finale

0,15 sunt considerate ca fiind pozitive. 2.2.4. Probele de testat care dau valori intermediare ale absorbtiei sunt neconcludente și trebuie aplicată o a doua tehnica pentru a confirma rezultatele. 3. TESTUL ELISA DE BLOCARE PENTRU DETECTAREA ANTICORPILOR IMPOTRIVA VIRUSULUI PESTEI ECVINE (AVPE) (TEST PRESCRIS) Testul ELISA de blocare este destinat detectarii anticorpilor AVPE specifici din serul speciilor susceptibile. VP7 este proteina virala antigenica majoră a VPE și este conservată în cadrul a 9 serotipuri. Datorită faptului ca anticorpul monoclonal (Acm) este de asemenea directionat împotriva lui VP7, proba va avea un înalt nivel de sensibilitate și specificitate. Mai departe, antigenul VP7 recombinat este total inofensiv și de aceea este garantat un grad mare de siguranță. Principiul testului este întreruperea reacției dintre antigenul recombinat VP7, ca antigen legat de placa pentru ELISA, și Acm conjugat, rezultând o reducere a culorii. Testul descris în continuare este efectuat în cadrul Laboratorului European de Referința pentru Pesta Ecvina din Algete, Spania. 3.1. Procedura de testare 3.1.1. Plăcile pentru ELISA 3.1.1.1. Se acoperă plăcile pentru ELISA cu AVPE-4 VP7 recombinat, diluat în soluție tampon carbonata/ bicarbonata, cu pH de 9,6. Se incubeaza peste noapte la 4°C. 3.1.1.2. Plăcile se spala de cinci ori cu soluție salina fosfata tamponata (SSFT) care conține 0,05 % (v/v) Tween 20 (SSFTT). 3.1.1.3. Placa se stabilizeaza prin tratare cu o soluție stabilizatoare (pentru a permite stocarea pe termen lung la temperatura de 4°C fără pierderea activității) și se usucă pe material adsorbant. 3.1.2. Probele de testat și controale 3.1.2.1. Pentru verificare: - se dilueaza 1/10 serurile de testat și cele de control în SFTT, direct pe placa, pentru a se obține un volum final de 100 f2æl/godeu. Se incubeaza o ora la 37°C. 3.1.2.2. Pentru titrare: - se prepara o serie dubla de dilutie din serurile de testat și testele de control pozitive (100 f2æl/godeu) de la 1/10 la 1/280 în 8 godeuri. Probele de control negative sunt testate la o dilutie de 1/10. 3.1.3. Conjugatul Se adauga Acm (anticorp monoclonal specific pentru VP7) conjugat cu peroxidaza din hrean, prediluat, câte 50 f2æl/godeu în fiecare godeu și se amesteca ușor pentru a asigura omogenizarea. Se incubeaza timp de 30 de minute la 37°C. 3.1.4. Se spala plăcile de cinci ori cu SSFTT și se usucă asa cum a fost descris mai sus. 3.1.5. Cromogen/ Substrat Se adauga câte 100 f2æl/godeu de soluție de cromogen/ substrat (1 ml ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolina-6-acid sulfonic])5 mg/ml

9 ml de soluție tampon de substrat (soluție tampon de fosfat-citrat 0,1 M cu pH de 4, care conține H(2)O(2) 0,03 %] și se incubeaza timp de 10 minute la temperatura camerei. Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea a 100 f2æl/godeu de SDS 2 % (Sulfat dodecil de sodiu). 3.1.6. Citirea Se Citesc la 405 nm la un cititor pentru ELISA. 3.2. Interpretarea rezultatelor 3.2.1. Validarea probelor Testul este valid atunci când densitatea optica (DO) a testului de control negativ (TCN) este mai mare de 1,0 și DO a testului de control pozitiv (TCP) este mai mica de 0,2. 3.2.2. Calcularea valorii finale Valoare finala pozitiva = TCN - ((TCN -TCP)x 0,3) Valoare finala negativa = TCN - ((TCN -TCP)x 0,2), unde TCN este DO a testului de control negativ, iar TCP este DO a testului de control pozitiv. 3.2.3. Interpretarea rezultatelor Probele cu DO mai mica decât valoarea finala pozitiva trebuie să fie considerate drept pozitive pentru anticorpii VPE. Probele cu DO mai mica decât valoarea finala negativa trebuie să fie considerate drept negative pentru anticorpii VPE. Probele cu DO situata între aceste doua valori trebuie să fie considerate neconcludente și să fie recoltate iar probe de la animale după doua sau trei săptămâni.